导语:欢迎来到小林美食空间,小编今天给大家分享培育无病毒草莓苗的方法包括热处理、花药培养、茎尖组织培养,希望对您有所帮助。
培育草莓无病毒苗的方法包括热处理脱毒方法,花药培养方法和茎尖组织培养方法。
1、热处理脱毒法
因此,在高温下,病毒颗粒的增殖和破坏的平衡被破坏,从而病毒含量不断减少,因此在一段时间后,病毒自身消除并达到解毒的目的。然而,由于草莓病毒的种类不同,一些病毒很容易通过热处理解毒,而其他病毒难以除去。草莓病毒病治疗的解毒过程如下。
(1)为了培养准备热处理的盆栽草莓苗,必须注意根系的稳健生长。移栽后,优选在培养1-2个月后,严格禁止进行热处理,以增加耐高温性。
(2)热处理过程中的空气湿度不宜过高,一般保持在50%~70%,盆栽幼苗的土壤水分应保持在草莓生长不收缩的程度。
(3)防止花盆中水分蒸发,增加空气湿度。花盆可以用塑料袋包裹,也可以用塑料花盆代替。
(4)热处理的盆栽草莓,优选具有较成熟的老叶,以提高幼苗的耐热性。
(5)用35~38C変温处理,可延长草莓在热治疗中的生长时间,提高成活率。热治疗需要掌握的是处理好时间与温度,因病毒种类不同而异。如草莓斑驳病毒,用热治疗比较容易脱除,在38C恒温条件下,处理12~15天即可脱除;草莓轻型黄边病毒,热治疗虽能脱除,但处理时间较长,一般需50天以上;草莓镶脉病毒,因耐热性强,用热治疗不容易脱除。草莓皱缩病毒,也需要38C恒温条件下,处理50天以上才有效。
2、花药培养脱毒法
草莓花药培养解毒的方法和培养方法如下。
(1)接种期和材料消毒。当草莓萌芽时,提取具有不同发育程度的花蕾,用醋酸乙酯染色,并用显微镜检查观察花粉发育期。当花粉发育到单核阶段时,花蕾可以接种花药。如果没有染色和显微镜检查的条件,可以掌握花蕾的大小,并且当花蕾发育到直径约4米并且花冠没有松散时可以收集花蕾。首先用流水冲洗收集的花蕾30分钟,在4至5℃的低温条件下放置24小时,然后在无菌条件下灭菌。方法是首先将花蕾浸泡在70%酒精中半分钟,然后将其浸入10%漂白上清液或0.1%汞水中10至12分钟,倒出消毒剂,用无菌水冲洗4至5次。取出花蕾,用镊子小心地剥离花药,置于无菌培养基中,将30-40个花药接种到每个培养瓶中,然后置于培养室中进行培养。
(2)培养方法。
①意伤组织诱导。草莓花药接种在MS+6-BA1.2亳克/升+NAA0.3毫克/升+蔗糖30克/升+琼脂粉6克/升pH6.0左右的愈伤组织诱导培养基上26C培养3周左右可诱导出小米粒状乳白色或淡绿色大小不等的意伤组织,当意伤直径长到3~4毫米时即可转分化培养。
②植株分化。将意伤转移到MS+6-BA1.0克/升+IBA0.2毫克/升+蔗糖30克/升+琼脂粉6克/升、pH6.0左右的培养基上,26C培养1~2个月可以分化出绿色小植株。因品种而异可以对激素浓度进行适当调整,以提高植株的分化率。
③植株繁殖和生根。小植株可以在MS+6-BA0.8毫克/升+IBA0.1毫克/升+蔗糖30克/升+琼脂粉6克/升pH6.0左右的培养基上快速繁殖多代。将增殖的植株转移到1/2MS+NAA0.05毫克/升+IBA0.05毫克/升+蔗糖30克/升+琼脂粉6克/升、pH6.0左右的生根培养基上,10~15天几乎%的植株生根,根的质量好,容易移栽成活。
3、茎尖脱毒培养方法
草莓茎尖分生组织培养可有效去除病毒并获得无病毒植物。芽尖培养可以去除病毒的原因是因为病毒不加选择地分布在植物上,即老叶和成熟组织器官中的病毒含量高,而幼虫和未成熟组织中的病毒含量高。器官非常低,增长率低。生长点(0.1~1.0亳米区域)则几乎不含或含病毒非常少。茎尖培养法脱毒效果好,后代遗传性稳定,是目前草莓无病毒苗培育应用最广的一个途径。既要考虑脱毒效果,又要考虑提高成活率,因此一般切取0.2~0.5亳米,带1~2个叶原基的茎尖作培养材料较好。
草莓茎尖培养的脱毒方法和步骤如下:
(1)取材和消毒。在选取田间生长健壮的匍匐茎顶端4~5厘米长的芽子多个,先用1.5%洗衣粉水洗刷表面活物及绒毛,再用流水沖洗30~45分钟。在无菌条件下将冲洗后的材料截成2厘米左右,先浸入70%的酒精中半分钟,再浸入10%漂白粉上清液或0.1%的升汞中消毒10~15分钟,然后再用无菌水冲洗4~5遍。将消毒后的材料用镊子夹到盛有滤纸的无菌培养皿中,放到双目解剖镜下,用解剖针轻轻剥取茎尖分生组织,一般保留1~2个叶原基,切取0.2~0.5毫米,立即放入三角培养瓶中,每瓶放5~6个茎尖。
(2)诱导芽分化和植株增殖。
①切取草莓茎尖分生组织接种在MS+6-BA1.0毫克/升+IBA0.1毫克/升+GA0.1毫克/升,蔗糖30克/升,琼脂粉6克/升。pH6.0左右,经高压灭菌消毒20分钟的培养基中。培养温度25~28C,光照强度34.1C%。
②小植株移栽。瓶内生根的植株,移栽前需经过光照锻炼3~7天再开盖锻炼1~2天的驯化过程后,以草炭、锯末、沙等基质中的一种或几种,与土以一定比例混合的苗床上移栽,栽后注意扣膜、保温、保湿,移栽成活率可达90%以上。
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